反相色谱填料的选择

日期：2024-05-09 07:50

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摘要：

现代高效液相色谱中，分离效果好坏的一个重要指标是反相色谱填料的选择。但是反相色谱填料的选择范围很宽，因此，要做合适的选择，必须对此有一定的认识和了解。

一、硅胶基质填料

1、正相色谱正相色谱用的固定相通常为硅胶（Silica）以及其他具有极性官能团胺基团，如（NH2，APS）和氰基团（CN，CPS）的键合相填料。

由于硅胶表面的硅羟基（SiOH）或其他极性基团极性较强，因此，分离的次序是依据样品中各组分的极性大小，即极性较弱的组份*先被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低，如正已烷（Hexane），氯仿（Chloroform），二氯甲烷（Methylene Chloride）等。

2、反相色谱填料用的填料常是以硅胶为基质，表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。反相色谱填料所使用的流动相极性较强，通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分*先被冲洗出，而极性弱的组分会在色谱柱上有更强的保留。

常用的反向填料有：C18（ODS）、C8（MOS）、C4（Butyl）、C6H5（Phenyl）等。

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