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部分常見的高分子類型高效反相色譜填料


高分子類型高效反相色譜填料都可以在廣泛的pH值(2-12,甚至1-14)范圍內使用。從化學結構來看,樹脂表面均有較強疏水作用,在乙腈-水或甲醇-水溶液的典型反相色譜淋洗條件下,其色譜性能基本上類似于硅膠基質的烷基鍵合相填料。
對于多孔結構填料的使用,應根據被分離樣品的分子量大小來選擇合適孔徑的填料。以多孔型的TSKgelPhenyl-5PWRP和Qc-tadecyl4PW兩種反相填料為例,前者適合于分離分子量大于10000的大分子化合物,而后者則對分子量小于10000的較小分子化合物是適宜的。同樣情況,如果選擇PLRP-S填料來分離肽類和蛋白質的話,那么孔徑為10nm的填料,大概對于15-20個氨基酸長度的肽類是合適的,孔徑為30nm的填料,對于中等分子量的球形蛋白質是適合的;孔徑為100unm的填料,對于較大的球狀蛋白質或那些纖維狀結構的化合物是適宜的;而孔徑為400nm的超大孔填料,則可分離很大分子量的物質。
在高效的反相色譜填料中,以SOURCE15RPC、30RPC和POROSR、C18兩類樹脂的性能*為優異。它們均有很高的負載量,均可在很高流速下使用,而且操作壓力都很低,對于快速高效高分辨的分離復雜生物大分子尤為適宜。表示POROOSR/H填充柱,在高流速的梯度淋洗條件下,分別對于蛋白質混合物和血管緊張肽組分(后者在堿性淋洗體系中)的分離結果。

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