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反相色譜填料的選擇

日期:2024-05-09 05:35
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摘要:
  
    現代高效液相色譜中,分離效果好壞的一個重要指標是反相色譜填料的選擇。但是反相色譜填料的選擇範圍很寬,因此,要做合適的選擇,必須對此有一定的認識和了解。
    一、矽膠基質填料 
    1、正相色譜正相色譜用的固定相通常為矽膠(Silica)以及其他具有極性官能團胺基團,如(NH2,APS)和氰基團(CN,CPS)的鍵合相填料。
    由於矽膠表麵的矽羥基(SiOH)或其他極性基團極性較強,因此,分離的次序是依據樣品中各組分的極性大小,即極性較弱的組份*先被衝洗出色譜柱。正相色譜使用的流動相極性相對比固定相低,如正已烷(Hexane),氯仿(Chloroform),二氯甲烷(Methylene Chloride)等。
    2、反相色譜填料用的填料常是以矽膠為基質,表麵鍵合有極性相對較弱官能團的鍵合相。反相色譜填料所使用的流動相極性較強,通常為水、緩衝液與甲醇、乙腈等的混合物。樣品流出色譜柱的順序是極性較強的組分*先被衝洗出,而極性弱的組分會在色譜柱上有更強的保留。
    常用的反向填料有:C18(ODS)、C8(MOS)、C4(Butyl)、C6H5(Phenyl)等。

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